尊龙凯时发布的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒为研究人员提供了强有力的工具。该套件,货号为YJ-MSCYD-004,价格为12800元,分为100ml和200ml两种规格,旨在增强间充质干细胞向成脂细胞的转化能力。请注意,该产品仅用于科研用途,严禁用于诊断、治疗、临床或家庭等非科研用途。
本试剂盒包含以下成分,存放条件如下:
- 诱导分化添加剂Ⅰ:5mL(100mL规格)/10mL(200mL规格),保存于-20℃,有效期为1年
- 诱导分化添加剂Ⅱ:1mL(100mL规格)/2mL(200mL规格),保存于-20℃,有效期为1年
- 优质胎牛血清:10mL(100mL规格)/20mL(200mL规格),保存于-20℃,有效期为1年
- 细胞基础培养基:85mL(100mL规格)/170mL(200mL规格),保存于4℃,有效期为1年
- 油红O染色液:5mL(100mL规格)/10mL(200mL规格),保存于4℃避光,有效期为1年
为确保产品有效性,应避免反复冻融。配制好的诱导培养基需在2-8℃保存,使用有效期为2周,因此请根据实验需要合理配制。
- 在室温下融化各成分,轻微离心以集中溶液到离心管底部。如果有沉淀,属于正常现象,无需过滤。
- 在无菌操作台上配制50mL的诱导分化培养基,配比如下:
- 诱导分化添加剂Ⅰ:5% (25mL)
- 诱导分化添加剂Ⅱ:0.1% (50μL)
- 优质胎牛血清:10% (5mL)
- 细胞基础培养基:85% (425mL)
2. 诱导分化操作步骤:
- 选取第3~5代、纯度超过90%、状态良好的间充质干细胞,消化、离心并调整细胞密度,接种于培养瓶中,置于37℃及5% CO2培养箱中。
- 当细胞汇合度达到80%~100%时,进行诱导分化。
- 小心吸弃培养上清,缓慢加入预热至37℃的诱导分化培养基,继续培养。
- 每2~3天更换新鲜的诱导分化培养基,如果上清液呈澄清黄色,需缩短换液周期。
- 细胞诱导三周后,可进行油红O染色鉴定。
3. 油红O染色分析:
- 诱导分化结束后,小心吸弃培养上清,用1×PBS润洗1~2次,接着加入细胞固定液,室温固定30分钟。
- 配置油红O工作液,按照3:2的比例混合油红O贮存液和蒸馏水,过滤后备用。
- 吸弃固定液,用1×PBS洗涤两次,然后加入油红O工作液进行染色30分钟。
- 吸出染色液,再用PBS洗去多余染色,观察细胞内油滴的红色效果。
使用尊龙凯时的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,科研人员能够在生物医学研究中更有效地探索细胞分化的机制,推动科学的进步。