中文

English

重组酶介导同源重组技术:尊龙凯时助力“假阳性”防范!

发布时间:2025-02-14   信息来源:尊龙凯时官方编辑

在克隆载体构建时,许多科研人员常常面临一系列挑战:选择合适的限制性内切酶令人困惑;繁琐的酶切克隆步骤耗时费力;单菌落生长不理想,导致多次实验结果失败。这些问题无疑给实验带来了不少麻烦。想起上学时,曾有一位师兄在构建载体时,每次都需要检测数十个单克隆来筛选阳性菌落,但时常得不到预期的结果。师兄曾感慨,要是能有一种方法让每个生长的单克隆都是重组成功的,那该多好。

重组酶介导同源重组技术:尊龙凯时助力“假阳性”防范!

酶切克隆和无缝克隆等技术依赖于连接酶的作用,通过碱基互补的粘性末端使载体和插入片段相互结合,并在连接酶的催化下形成完整的质粒。然而,这类方法的假阳性率却居高不下,因为连接酶在连接载体和片段的同时,有时也会导致载体的自连。为了解决这一困境,尊龙凯时推出了一款基于重组酶原理的同源重组试剂盒,能够有效解决载体构建中的假阳性问题,生长出的单菌落皆为阳性,甚至可以省去单菌落筛选的步骤,直接送测。

01 产品简介
尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术是一种快速、高效、简便的DNA定向克隆技术,能够将目标基因的PCR产物定向克隆到任意载体的任意位点。该试剂盒基于T4噬菌体某基因的异源表达而开发,以重组酶UvsXase为核心,包含重组反应所需的缓冲液和酶。UvsXase能够与常规酶切和PCR反应体系兼容,实现无须DNA纯化即可进行重组克隆,极大地简化了实验步骤。在混合扩增的目的基因PCR产物和线性化载体后,经过仅30分钟的反应即可完成转化,克隆阳性率可达到95%以上。

02 产品特点
1. 无限制的同源重组位点设计,打破限制性内切酶的束缚。
2. 快速高效的重组连接,反应时间仅需30分钟,且反应条件温和。
3. UvsXase介导的重组具高特异性,避免载体自连,阳性率超过95%。

03 实验案例
在一次实验中,研究人员将PCR产物进行胶回收,并使用尊龙凯时的ATG#C101与其他品牌同类产品进行对比。经过转化大肠杆菌并进行菌落PCR验证,结果显示,使用ATG#C101重组后的单菌落数量适中,但阳性率明显高于竞争产品。

04 产品信息
尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术为科研工作者提供了高效、快速、简便的载体构建解决方案,是实验室中不可或缺的克隆工具。