尊龙凯时推出的人白介素17(IL-17) ELISA试剂盒仅限于科学研究领域,不得应用于医学诊断。本文将详细介绍该试剂盒的检测原理、样本处理及保存方法。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入待测样本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过充分温育和洗涤后,应用底物TMB进行显色反应。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸的作用下最终呈现黄色。反应颜色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关关系。使用酶标仪在450nm波长处测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样本收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热源和内毒素的试管进行血样收集,避免细胞刺激。将收集到的血液以3000转的速度离心10分钟,以迅速分离血清与红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟,取上清液。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,经过3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:若不及时检测样本,建议按一次用量分装后在-20℃冷冻存储,避免反复冻融,解冻时需在室温下确保样品均匀充分解冻。
试剂配置与操作注意事项
试剂盒配方说明:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
20×洗涤缓冲液的配制:将1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水稀释混合。
结果判断与标准曲线绘制
在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,通过线性回归得到标准品曲线方程,从而计算各样本的浓度值。
请注意,尊龙凯时不对试剂盒的具体性能进行保证或声明,适用性需自行评估。