在实验室细胞培养过程中，是否有遇到过细胞状态不佳的情况？胎牛血清（FBS）作为细胞培养中不可或缺的关键成分，对细胞的生长和状态起着至关重要的作用。因此，我们总结了一些重要的使用提示，供大家参考，记得收藏哦！

胎牛血清的储存

胎牛血清一般应储存在-20℃，如果希望长时间保存，可以选择-80℃，并尽量避免反复冻融。如果确实需要多次使用，建议采用分装的方法，提前将其分装成每次所需用量，然后一起冷冻，使用时按需解冻。此外，您也可以直接购买小规格的50mL，使用起来更加方便。

胎牛血清的解冻方法

在解冻胎牛血清时，建议将其从低温环境中取出后放置于2-8℃的冰箱中慢慢解冻（可过夜），待其部分融化后，再在室温下完全融解。在此过程中，需不时摇晃瓶身以便均匀混合。这样的方法可以有效降低沉淀物的产生。切勿将其直接从低温环境转移至25-37℃的环境中解冻，这容易导致絮状沉淀的形成，并影响血清中某些物质的活性，从而妨碍细胞的生长和增殖。

胎牛血清中沉淀物解析

胎牛血清在解冻后可能会出现沉淀，这些沉淀物可能包括纤维蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻连蛋白等。最常见的沉淀物为纤维蛋白，其体积较大，易被肉眼识别。纤维蛋白的形成通常是由于血清中纤维蛋白原在解冻时凝结所致。此类沉淀物可通过离心（如以400-600g离心5分钟）去除，取上清液进行后续实验。

导致沉淀的原因

沉淀物的产生可能有多种原因，包括温度变化、反复冻融、热灭活以及长时间存放等。值得注意的是，沉淀物本身并不直接影响血清的质量，但如果沉淀覆盖在细胞表面，可能会影响其对营养物质的吸收。因此，如果需要，建议在加入培养基后进行离心去除沉淀。

胎牛血清的过滤需求

胎牛血清在出厂前已经经过严格的无菌处理与质检，因此一般情况下不需要额外过滤。如果担心沉淀物的影响，可以选择离心处理去除沉淀，必要时也可以在加入培养基后一起过滤，用以减少对营养成分的损失。

细胞消化的正确步骤

当细胞达到约80%密度时即可进行消化。首先用PBS润洗细胞2-3次，接着将预热至37℃的胰酶（通常为0.25%浓度）加入培养瓶中，通常加入1mL胰酶（如有需要可增加至15mL）。将培养瓶置于37℃培养箱中进行消化，大约2-5分钟即可观察细胞状态。如果观察到细胞开始松动且呈圆形状态，则可加入含血清的培养基终止消化，并通过离心收集细胞。

替换胎牛血清品牌的操作

当您希望更换胎牛血清品牌时，建议首次添加比例为25%新血清与75%原血清混合，随后可逐步增加新血清的比例，直到达到100%。此过程有助于细胞适应新的环境，减少细胞增殖减缓或死亡的风险。因此，科学的逐步替换是非常重要的。

小黑点的鉴别与处理

在显微镜下观察到的“小黑点”可能来源于多种原因，包括细菌污染、真菌污染、细胞碎片、血清沉淀等。可以通过观察这些点的移动性及形态来初步判断其性质。若判断为微生物污染，建议及时处置并彻底消毒所有设备。如果是沉淀物影响，建议在静置后取上清重新培养。

胎牛血清的灭活需求

对于绝大多数细胞的培养而言，胎牛血清一般不需要进行加热灭活，但在某些特定的实验中，如免疫学研究等，推荐使用灭活血清。需注意，加热过程可能会影响一些热稳定蛋白的活性，适当的灭活温度为56℃，加热30分钟，且需不断摇动混匀。

在选择使用尊龙凯时的胎牛血清时，您将体验到高品质的实验材料支持，推动您的生物医学研究向更高水平迈进！